HPLC測定沒食子中沒食子酸的含量
摘要：據(jù)國外外文獻記載，沒食子酸最早由舍勒制得。但古代中國早在這以前就有明確記載。明代李挺的《醫(yī)學入門》中記載了用發(fā)酵法從五倍子中得到?jīng)]食子酸的過程。
目的建立沒食子中沒食子酸的含量測定方法。方法采用液相色譜法測定沒食子酸的含量，色譜柱為Waters Symme @Cl8柱(5μm，4。6 mm×150mm)；流動相為甲醇一0。05％磷酸溶液(5：95)；流速0。8 ml·min ；檢測波長273 Bill。結(jié)果沒食子酸進樣量在0。0506～0。4060μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均加樣回收率為98。99％，RSD：1。5％。結(jié)論所用方法簡便、快速、準確。
? 沒食子是由沒食子蜂的幼蟲寄生于沒食子樹幼枝上所產(chǎn)成的蟲癭。沒食子中含有鞣質(zhì)和沒食子酸，為維吾爾醫(yī)生常用藥，具有收斂、抗炎、促進黏膜愈合的作用?，F(xiàn)參照文獻
J 采用HPLC測定沒食子中沒食子酸的含量。
1 實驗部分
1。1 儀器與試藥：高效液相色譜儀包括Waters Delta 6OO泵，waters 2996 PDA檢測器(美國Waters公司)。沒食子藥材(新疆維吾爾自治區(qū)藥品檢驗所鑒定)；沒食子酸對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：0831—9501)；甲醇(色譜純)；磷酸(分析純)；水為重蒸水。
1。2 色譜條件
色譜柱為Waters SymmetryCl8(5μm，4。6mm×150 mm)；流動相為甲醇一0。05％磷酸溶液(5：95)；檢測波長273nm；流速0。8 ml/min ；柱溫25℃。
1。3 方法與結(jié)果
1。3。1 溶液的制備：精密稱取沒食子粗粉1 g，置50 m1量瓶中，加甲醇30 m1，超聲提取1 h，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液l m1，甲醇定容至l0 m1量瓶中，搖勻，作為供試品溶液。精密稱取干燥至恒重的沒食子酸對照品2。55mg，置50 m1量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，得對照品溶液。
1。3。2 線性范圍的考察：精密吸取沒食子酸對照品溶液1。0、2。0、4。0、6。0、8。0 ml于5個l0 m1量瓶中，分別加甲醇至刻度，搖勻，各吸取l0 l注入高效液相色譜儀，以進樣量( g)為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線，回歸，得線性方程為：A=1。468×lO6C-1。 739×lO4(r=0。9997)。結(jié)果表明，沒食子酸在0。0506 0。4O60／_tg范圍內(nèi)，具有良好的線性關(guān)系。
1。3。3 精密度試驗：在“1。2。1”項條件下，精密吸取沒食子酸對照品溶液10μl，連續(xù)進樣6次，峰面積的RSD=1。3％ ，表明儀器精密度良好。
1。3。4 穩(wěn)定性實驗：取室溫下放置的樣品溶液，在20 h內(nèi)進樣6次，其峰面積的RSD=2。4％，表明樣品溶液在室溫下20 h穩(wěn)定。
1。3。5 方法精密度(重復性)試驗：精密稱取沒食子藥材1 g，按“1。3。1”項下方法制備6份供試品溶液，分別測定沒食子酸的含量，RSD=3。8％，證明此方法精密度良好。
1。3。6 加樣回收率試驗：精密稱取已知含量的沒食子樣品細粉，分別加入沒食子酸對照品，按“1。 3。8”項下方法測定沒食子酸的含量，再計算回收率，結(jié)果見表1。
1。3。7 樣品的測定：精密稱取沒食子藥材1 g，按“1。 3。1”項下方法制備供試品溶液，經(jīng)微孔濾膜(0。45μm)過濾，取續(xù)濾液l0 l進樣，同時進l0μl對照品溶液，進樣5次，用峰面積按外標法計算，得沒食子酸的平均含量31。65 mg/g，RSD=0。98％(n=5)。
2 討論
沒食子中主要含有可水解的鞣質(zhì)，加熱提取會水解成沒食子酸，因此，樣品選用超聲提取的方法。曾分別超聲0。5、1。0、1。5、2。0 h，結(jié)果顯示，1。0 h已經(jīng)提取完全。文中方法用于沒食子中沒食子酸的含量測定，操作簡便，結(jié)果準確。
(來源：中國化工儀器網(wǎng))
