高效液相色譜法測(cè)定百癬夏塔熱膠囊中沒(méi)食子酸
摘要：用液相色譜法測(cè)定沒(méi)食子酸在百癬夏塔熱膠囊中的含量。方法采用ODSC18柱(5μm，4.6mm×200mm)，流動(dòng)相為乙腈0.1%磷酸(5.5∶94.5)，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，流速為1.0ml？min1，柱溫：室溫。
復(fù)方苦參洗劑由苦參、蛇床子、花椒、地膚子、白鮮皮等8味藥材組成，其中苦參為君藥，其中主要含有生物堿成分，而以苦參堿和氧化苦參堿含量最 高，對(duì)于其含量測(cè)定方法以薄層掃描為主，但其操作復(fù)雜。高效液相色譜法也有報(bào)道，但是主要以氨基柱為多，也有采用離子對(duì)色譜進(jìn)行測(cè)定，對(duì)各種色譜條件經(jīng)過(guò)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，均不能對(duì)本品含量進(jìn)行有效的測(cè)定。本文最終以高效液相色譜法，采用常用的C18柱成功地建立了適合本制劑的含量測(cè)定方法，制定出合理的含量限度。經(jīng)過(guò)方法學(xué)考察及3批樣品測(cè)定，測(cè)定方法提取完全性、重現(xiàn)性、精密度良好，回收率符合要求，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程可操作性強(qiáng)，能夠客觀地控制本品的質(zhì)量。
1、儀器與試藥
1.1儀器Waters600E高效液相色譜儀，Waters600泵，Waters2487紫外檢測(cè)器，millog色譜工作站。
1.2試劑與試藥苦參堿對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供(批號(hào)：805-200206)，乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純，水為雙蒸水，復(fù)方苦參洗劑樣品為自制。
2、方法與結(jié)果
2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性色譜柱KromosilODSC18(5μm，4.6mm×200mm)，乙腈0.1%磷酸(5.5∶94.5)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，柱溫：室溫。在此條件下，樣品得到良好分離。缺苦參陰性對(duì)照在苦參堿峰處無(wú)峰出現(xiàn)，不干擾本品的測(cè)定。
2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每毫升含0.13mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液3，5，10，15，20μl，按上述色譜條件注入色譜儀，測(cè)定峰面積，以峰面積對(duì)苦參堿進(jìn)樣量回歸，計(jì)算的回歸方程為：A=1409106.046C＋97272.17，相關(guān)系數(shù)r=0.9991，苦參堿在0.39～2.60μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。
2.3精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取樣品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積，結(jié)果峰面積的RSD0.70%，表明本方法精密度良好。
3、討論
在本實(shí)驗(yàn)色譜條件下，苦參堿得到良好分離，但是氧化苦參堿不能得到有效分離，經(jīng)過(guò)多方實(shí)驗(yàn)，也未能得到理想效果，因此，沒(méi)有對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)苦參堿含量與原藥材比較偏高，可能因?yàn)樘幏街猩叽沧雍械倪€原性成分的影響，使氧化苦參堿轉(zhuǎn)變?yōu)榭鄥A的緣故。本實(shí)驗(yàn)色譜條件中流動(dòng)相pH接近2，在一般色譜柱適用范圍下限。因此，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)立即用水沖洗色譜柱。
結(jié)果
苦參堿在0.39～2.60μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9991)，方法的回收率為96.32%，RSD為1.16%(n=5)。結(jié)論該方法能準(zhǔn)確可靠地進(jìn)行苦參堿的含量測(cè)定，能夠有效地控制該制劑的質(zhì)量。
(來(lái)源：中國(guó)化工儀器網(wǎng))
